Десять команд, которые успешно преодолели барьер раунда плей-офф, присоединятся на жеребьевке к 22 клубам, попавшим в основную сетку напрямую.
Как отмечает официальный сайт УЕФА, в этом году в групповом этапе дебютируют сразу несколько команд, среди которых "Вольфсбург", казанский "Рубин", "Алкмаар", "Стандард", "Униря", "Дебрецен", АПОЕЛ и "Цюрих". Всего в нынешнем розыгрыше свои силы попробуют представители 18 стран.
32 участника основной сетки распределены по четырем корзинам, команды в которых будут разводиться по разным группам. При этом представители одной страны в одну группу попасть также не могут. Распределение команд по корзинам основывается на их рейтинге в таблице коэффициентов УЕФА.
Посев участников Лиги чемпионов сезона 2009/10:
| Корзина 1 |
| "Барселона" |
| "Челси" |
| "Ливерпуль" |
| "Манчестер Юнайтед" |
| "Милан" |
| "Арсенал" |
| "Севилья" |
| "Бавария" |
| Корзина 2 |
| "Лион" |
| "Интер" |
| "Реал" |
| ЦСКА Москва |
| "Порту" |
| "Алкмаар" |
| "Ювентус" |
| "Рейнджерс" |
| Корзина 3 |
| "Олимпиакос" |
| "Олимпик" |
| "Динамо" Киев |
| "Штутгарт" |
| "Фиорентина" |
| "Атлетико" |
| "Бордо" |
| "Бешикташ" |
| Корзина 4 |
| "Вольфсбург" |
| "Стандард" |
| "Маккаби" Хайфа |
| "Цюрих" |
| "Рубин" |
| "Униря" |
| АПОЕЛ |
| "Дебрецен" |
Самый высокий коэффициент по умолчанию имеет действующий победитель турнира "Барселона". "Реал" же, несмотря на статус самой успешной команды в истории Кубка чемпионов, оказался во второй корзине вместе с московским ЦСКА и итальянскими "Интером" и "Ювентусом". В третьей корзине тем временем обосновались "Атлетико", "Фиорентина" и киевское "Динамо", а "Рубин" начнет пробиваться к европейской славе с самых низов.
Матчи первого тура запланированы на 15/16 сентября, после чего борьба продолжится 29/30 сентября, 20/21 октября, 3/4 ноября, 24/25 ноября и 8/9 декабря. По две лучшие команды каждой группы пробьются в 1/8 финала, жеребьевка которой состоится 18 декабря. Обладатели третьих мест тем временем попадут в 1/16 финала Лиги Европы УЕФА.